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培養液pH對細胞的影響?

發布日期: 2021-01-21
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培養液pH對細胞生長的影響?

由于大多數細胞適宜pH為7.2-7.4,偏離此范圍可能對細胞生長將產生有害的影響。但各種細胞對pH的要求也不完全相同,原代培養細胞一般對pH變動耐受差,無限細胞系耐受力強。但總體來說,細胞耐酸性比耐堿性強一些。在配制培養用液時,需要注意一點:培新配的培養基在經過0.10um或0.22um濾膜過濾時,溶液的pH還會向上浮動0.2左右。

培養液pH下降很快可能原因有哪些?其解決辦法是什么?

通常細胞生長得非??鞎r,pH值通常下降得很快。此時可以及時傳代、提高傳代比例或降低血清量等方法進行解決。此外,培養瓶蓋擰得太緊、NaHCO3 緩沖系統緩沖能力不夠、培養液中鹽濃度不正確、細菌、酵母或真菌污染等也能導致pH值通常下降得很快。

(1)按培養液中NaHCO3 濃度增加或減少培養箱內CO2 濃度,2.0g/L 到3.7g/L 濃度NaHCO3對應CO2濃度為5%到10%。

(2)改用不依賴CO2培養液。

(3)松開瓶蓋1/4 圈。加HEPES 緩沖液至10 到25mM終濃度。

(4)在CO2 培養環境中改用基于Earle′s 鹽配制的培養液,在大氣培養環境中培養改用Hanks 鹽配制的培養液。

(5)如果是污染造成的則丟棄培養物或用抗生素除菌。

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