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從多角度了解人源細胞系

發布日期: 2021-01-22
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   人源細胞系(通過選擇的永生細胞株,包括HeLa、OVCAR-3和LNCaP等常見癌癥細胞系)
  人源細胞系是一個統稱,實驗室常用的有結腸癌腫瘤細胞系,該細胞系中可檢測到活躍的人源。
  人神經膠質細胞系,衍化神經營養因子(GDNF)ELISA試劑盒,常用檢測步驟:
 ?。?)將待檢血清用稀釋液從1:100開始作2倍連續稀釋,加入抗原孔,100&mu;l/孔,同時設陰、陽性對照,37℃水浴1小時;
 ?。?)棄去血清,用洗滌液洗滌5~6次;
 ?。?)加酶結合物,用稀釋液按工作濃度稀釋,100&mu;l/孔,37℃水浴1小時;
 ?。?)棄去酶標抗體,用洗滌液洗滌6次,甩干;
 ?。?)加顯色液:于各反應孔內加A/B液各一滴,37℃,避光3~5分鐘;
 ?。?)加終止液于每反應孔,一滴/孔。
  人源細胞系細胞來源主要有:
  同一個實驗室可以傳承師兄師姐的細胞系。
  搜集標本,學習師兄師姐的成熟方法培養原代細胞。
  或者通過各方面打聽,向別的實驗室“化緣”而來。
  另立門戶,滿世界尋找新的細胞。
  細胞來源控制:
  一般從各個來源獲得的細胞,換一個環境培養的時候都需要經過一個磨合期。
  原代細胞培養盡量不要傳太多代,不要輕易更換培養條件。
  通常細胞系傳代培養幾代以后狀態會變好。如果狀態一直很差,可以通過觀察細胞形態等確定細胞是否老化、污染、凋亡等。
  一般人源細胞系細胞培養注意事項:
  1.傳代培養時要注意無菌操作并防止細胞之間的交叉污染,所有操作要盡量靠近酒精燈火焰。每次只進行一種細胞的操作。每一種細胞使用一套器材,培養用液應嚴格分開。
  2.每天觀察細胞形態,掌握好細胞是否健康的標準:健康細胞的形態飽滿,折光性好,生長致密時即可傳代。
  3.如發現細胞有污染跡象,應立即采取措施,一般應棄置污染的細胞,如果必須挽救,可加含有抗生素的BSS或培養基反復清洗,隨后培養基中加入較大量的抗菌素,并經常更換培養基等。
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