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Gibco胎牛血清的四個制備流程

發布日期: 2021-04-01
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   GIBCO胎牛血清應用在哺乳動物細胞培養中;因此,胎牛血清應用很廣泛。比如,胎牛血清能夠用在科研、工業生產、人獸疫苗生產的質量控制及生物技術藥物的質量控制領域。其中含有蛋白質、氨基酸、葡萄糖、激素等,其中蛋白質主要為白蛋白和球蛋白。氨基酸有多種,是細胞合成蛋白質的基本成分,其中有些氨基酸動物細胞本身不能合成(稱為必需氨基酸),必須由培養液提供。
  GIBCO胎牛血清功能:
  胎牛血清是細胞培養中用量最大的天然培養基,含有豐富的細胞生長必須的營養成份,常用于動物細胞的體外培養,具有極為重要的功能。
  1、提供對維持細胞指數生長的激素,基礎培養基中沒有或量很少的營養物,以及主要的低分子營養物。
  2、提供結合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他激素等,能結合或調變它們所結合的物質活力。
  3、起酸堿度緩沖液作用。
  4、是細胞貼壁、鋪展在塑料培養基質上所需因子來源。
  5、有些情況下結合蛋白質能與有毒金屬和熱原質結合,起到解毒作用。
  6、提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。
  Gibco胎牛血清的四個制備流程:
  1、血清來源:可從世界各國收集胎牛血清,但是必須符合他的質量標準。地方當局還不清楚本地是否有牛海綿狀病毒流行的血清不收集,有說明血清質量的證明資料:包括收集過程的全部資料、檢驗結果和交付情況。
  2、血清的收集:胎牛血清是心臟穿刺取血,新生牛(10~14天)和小牛(10個月內)血清靜脈取血。血清采集條件必須符合工業生產的標準:低溫下采集、一次分離、分離后立即混合凍存。符合要求的血清56℃水浴30分鐘滅活。
  3、血清的制備:
  a. 超低IgG胎牛血清:通過親和層析工藝去除胎牛血清中的γ球蛋白,使FBS γ球蛋白含量減到低,一般IgG≤5ug/ml,生物學活性不變。
  b. 血清透析:用12000~14000分子量的透析膜在0.15M NaCl中透析直到使葡萄糖含量<0.5mg/ml(用葡萄糖氧化酶/過氧化酶方法測定)。
  c. γ-射線照射:已經證明γ-射線照射可以有效滅活血清中可能污染的病毒、支原體。照射劑量為30~45KG。而且這個劑量的γ-射線照射不會改變血清的理化性質和對細胞培養的影響。
  4、除菌過濾:經過上述處理的粗制血清再經過一系列除菌濾膜過濾包括0.2微米(micron)和0.1微米濾膜。FBS要通過三層0.1微米濾膜,其他血清可通過0.2微米濾膜。
  GIBCO胎牛血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物,且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機物等,這些物質對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。
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